＋﹏＋ 可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。加盖玻片时不可有气泡，否则会影响观察。应用干墨水法时，涂片要放在火焰较高处并用文火干燥，不可使玻片发热。在采用Tyler法染色时，标本经染色后不可用水洗

(1)最好挑选18-24h的菌落进行革兰氏染色，培养时间过久的的革兰氏阳性细菌可能会被染成红色而造成假阴性。2)挑取适量的菌，不宜过多，均匀涂开。3乙醇脱色是革革兰染色的关键在于掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性仅可以被误染为阴性，而脱色不够时，阴性菌可以误染为阳性菌。操作中的注意事项，标本涂片不能太厚，玻片通过火焰的温度不

3、滴加染色液与酒精时肯定要掩盖整个菌膜，否则部分菌膜未受处理，亦可造成假象。4、乙醇脱色是革兰氏操作的关键环节。如脱色过度，则G+被误染成G-菌，而脱色不足，G-被误染成G+(四)注意事项1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱

(5) 吸干或在空气中凉干后，油镜镜检。革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影三、革兰氏染色注意事项1、一定要选处于活跃期的菌种染色，对数生长期细菌的形态生理特性最适宜染色，老龄的革兰氏阳性菌会被染成红色造成假阴性(老化后细胞壁

2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。3、选用幼龄的细注意事项1、选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。2、涂片不宜过厚，以免脱色不